اسکولین یک مشتق گلیکوزیدی کومارین است بسیاری از باکتریها میتوانند اسکولین را هیدرولیز کنند، اما تعداد کمی از آنها میتوانند این کار را در حضور صفرا انجام دهندباکتریهایی که بایل-اسکولین مثبت هستند میتوانند در حضور نمکهای صفراوی رشد کنند و هیدرولیز اسکولین در محیط کشت باعث تشکیل گلوکز و ترکیبی به نام اسکولتین میشود.اسکولتین به نوبه خود با یونهای آهن (که توسط محیط کشت غیرآلی سیترات آهن تامین میشود) واکنش میدهد تا یک ترکیب قابل انتشار سیاه را تشکیل دهدنتایج مورد انتظار
مثبت: رشد ارگانیسم و سیاه شدن آگار شیبدار
منفی: رشد ارگانیسم بدون سیاه شدن محیط یا بدون رشد
.
.