از کیت Real Time PCR برای بررسی کمی بیان ژن ها از تکنیک Real Time PCR استفاده میکنیم،و همچنین یک روش بسیار دقیق برای تشخیص سریع عوامل عفونی مثل ویروس ها،باکتری ها و جهش ها و … مورد استفاده قرار میگیرد.با استفاده از تکنیک Real Time PCR با استفاده از رنگ های فلوئورسنتی میتوانیم تکثیر DNA را مورد بررسی قرار دهیم.
مراحل تکنیک : RT-PCR
در ابتدا در واکنش رو نوشت برداری معکوس با استفاده از آنزیم RNA به cDNA تبدیل میشود.
مخلوط واکنش که شامل primer،آنزیم پلی مراز و بافر مناسب واکنش،cDNA اختصاصی ژن هدف مورد نظر،رنگ فلوئورسنت برای اندازه گیری تعداد قطعه ژنی و مستر میکس برای سرعت و آسانی کار کاربر آماده میشود.
مراحل سه گانه دمایی PCR را با استفاده از دستگاه Real Time PCRتکرار میکنیم که شامل Extension،Annealing و Denaturation است.
ویژگی های کیت Real Time PCR :
دارای تشخیص سریع و دقیق برای ژن های هدف با تعداد مختلف.
در دمای اتاق مخلوط مورد نظر را آماده میکند.
با دوره های سریع و استاندارد qPCR سازگاری بالایی دارد.
تالنتال